Analiza jakościowa dla WZW typu C

Pozostaw komentarz 9,080

Jakościowa analiza reakcji łańcuchowej polimerazy - PCR dla wirusowego zapalenia wątroby typu C określa obecność lub nieobecność HCV w organizmie. W warunkach laboratoryjnych badana jest struktura RNA, która obejmie wirus. W przypadku wykrycia wirusa C konieczne jest poddanie się kuracji, ponieważ zaniedbany stan wątroby spowoduje poważne konsekwencje. Wysokiej jakości reakcja PCR jest również przeprowadzana po odzyskaniu w celu potwierdzenia braku przeciwciał. Przypisany do rutynowej kontroli. Przy niskim stężeniu czynnika sprawczego we krwi PCR (jakościowy) może nie wykryć niczego, ponieważ system diagnostyczny ma własne progi czułości. W przypadku początkowego stadium choroby lub łagodnej postaci, ultra-diagnostyka PCR jest wykonywana na ultra czułym sprzęcie.

Co to jest wirus RNA?

Termin RNA wirusa zapalenia wątroby typu C (lub RNA wirusa zapalenia wątroby typu C) jest chorobą wątroby. Wirus C wiąże się ze zdrową komórką organizmu poprzez penetrację wewnątrz. Z biegiem czasu, rozprzestrzeniając się po całym organizmie, konieczne jest jedynie dostanie się do krwi. W rezultacie patogen przenika do wątroby, łączy się z komórkami i ciężko pracuje. Komórki wątrobowe (hepatocyty) działają pod jej wpływem, ulegając zmianom, i z tego powodu umierają. Im dłużej wirus C znajduje się w wątrobie, tym większa liczba komórek umiera. Z czasem rozwijają się niebezpieczne choroby, które prowadzą do złośliwej degeneracji i śmierci.

Zakażenie wątroby tym typem wirusa może nie objawiać się zewnętrznie. Przez wiele lat lub dziesięcioleci zarażona osoba czuje się całkowicie zdrowa, a tylko przypadkowe badanie najczęściej ujawnia patologię. Przekazując krew na zapalenie wątroby, bada się część łańcucha RNA (kwasu rybonukleinowego), który jest częścią ludzkiego genu (DNA). Wyniki badań laboratoryjnych nie powinny być stosowane do samodzielnego leczenia, ponieważ jest to tylko wskaźnik. Dokładny obraz i dalsza diagnoza jest lepiej określona przez lekarza.

Po zakończeniu: wskazania do badań

W celu potwierdzenia HCV przeprowadza się analizę PCR (reakcja łańcuchowa polimerazy). Badania PCR pomagają znaleźć materiał patogenu w strukturze RNA i zalecić skuteczną terapię. Mianowany w następujących przypadkach:

  • wykrycie objawów zapalenia wątroby;
  • badania przesiewowe pod kątem zapobiegania;
  • badanie osób w kontakcie;
  • rozpoznanie zapalenia wątroby o mieszanym pochodzeniu (określenie głównego patogenu);
  • określanie poziomu aktywności reprodukcyjnej wirusa w postaci przewlekłej;
  • marskość wątroby;
  • w celu określenia skuteczności przepisanego leczenia.
Badania PCR są przepisywane przez lekarza w celu określenia skuteczności leczenia zapalenia wątroby.

Istnieje zarówno jakościowa, jak i ilościowa analiza PCR. Ilościowa PCR pokazuje procentowy stosunek RNA do nosicieli wirusa we krwi, a jakościowy wskazuje na obecność wirusa lub jego brak. Dodatni wskaźnik jakości (obecność RNA wirusa zapalenia wątroby typu C) również wymaga badań ilościowych. Wysoki poziom stężenia czynnika powodującego zapalenie wątroby typu C jest związany z ryzykiem jego przeniesienia, to znaczy zakażenia innych. Niskie liczby są lepiej uleczalne. Ilość wirusów RNA we krwi nie jest związana z intensywnością choroby. Analiza PCR jest również przeprowadzana w przypadku terapii interferonem w celu określenia czasu trwania i złożoności przebiegu leczenia.

Cechy wysokiej jakości analizy PCR dla zapalenia wątroby typu C

Jakościowa analiza z indeksem reakcji łańcuchowej polimerazy jest przypisana wszystkim pacjentom, którzy mają we krwi przeciwciała przeciwko wirusowemu zapaleniu wątroby typu C. Chorzy, którzy byli chorzy i wyleczeni, muszą ponownie podjąć test. Zaleca się przeżycie testu na zapalenie wątroby typu B, a następnie, w przypadku pozytywnego wniosku, oraz na zapalenie wątroby typu D. Reakcję jakościowo analizowaną należy przeprowadzić w połączeniu z innymi badaniami krwi. Analizy pokażą pełny obraz rozprzestrzeniania wirusa.

Z wyników testu tylko pozytywny wynik testu na zapalenie wątroby typu C będzie widoczny lub ujemny, tj. Obecność lub brak wirusa. Jeśli dane wyjściowe zostaną "wykryte", wirus jest i nadal jest aktywny. Oznaczenie "nie wykryto" oznacza brak wirusa lub jego niewielką ilość. Przy tym wskaźniku należy pamiętać, że wrażliwość analityczna systemów diagnostycznych jest różna i że wirusowe zapalenie wątroby typu C może nadal znajdować się we krwi, ale nie przejawia się w analizie.

Szczególnie wrażliwa metoda PCR ultra-zapalenie wątroby C ujawnia się nawet w niewielkich ilościach. Zastosowano badanie hybrydyzacji fluorescencyjnej, które jest wielokrotnie wyższe niż standardowe systemy PCR. Metodę stosuje się w kilku przypadkach:

  • podejrzewane ukryte postacie zapalenia wątroby typu C;
  • Diagnostyka PCR nie potwierdziła patogenu, ale są przeciwciała;
  • w przypadku odzysku;
  • wykryć wczesną infekcję.
Powrót do spisu treści

Analiza dekodowania

Dekodowanie PCR HCV wpływa na ostateczną decyzję przy diagnozie, w szczególności metodą ultrametodową. Główną wadą tego badania jest ścisłe przestrzeganie sterylnych warunków dla próbki i materiałów. Niewielkie odchylenie pokazuje czasem niedokładne wnioski analityczne, komplikuje diagnozę i późniejsze leczenie. Analiza PCR w celu oznaczenia wirusowego zapalenia wątroby typu RNA nie zawsze z przekonaniem pokazuje obraz choroby, czasami niedokładności są dozwolone, i w obu kierunkach.

Diagnozując wirus zapalenia wątroby, zaleca się przeprowadzenie kompleksowego badania.

Norma wskaźników

Brak przeciwciał przeciwko JgM przeciwko wirusowemu zapaleniu wątroby typu C w wynikach badania jest uważany za normę w analizie reakcji łańcuchowej polimerazy. Jednocześnie odkrycia z analizy serologicznej wskazują na obecność przeciwciał przeciwko wirusowi C, który również znajduje się w normalnym zakresie. Definicja jakościowa nie pokazuje intensywności choroby, tylko ujawnia czynnik powodujący zapalenie wątroby typu C w RNA. Analiza ta jest powtarzana po leczeniu w celu potwierdzenia rzeczywistego powrotu do zdrowia.

Odchylenia

Jeśli obecne są przeciwciała JgM przeciwko HCV RNA, oznacza to rozwijającą się infekcję. Choroba w tym samym czasie postępuje ostro lub przewlekle, objawia się w różnych stadiach. Jeśli zanotowano spadek liczby przeciwciał, analiza będzie wskazywać, że wyniki leczenia zostały osiągnięte podczas odzyskiwania. W diagnozie znajdują się tylko wyjątkowo rzadkie przypadki fałszywie dodatnich wyników. Występują u kobiet w czasie ciąży oraz u osób z innymi chorobami zakaźnymi.

Koszt badań krwi i PCR w przypadku zapalenia wątroby typu C

Wirusowe zapalenie wątroby typu C jest patologią zapalną, w którą wpływają komórki wątroby. Choroba rozwija się w wyniku przenikania wirusa zapalenia wątroby typu C (HVC) do organizmu człowieka.

Postać choroby może być ostra lub przewlekła.

Najczęściej objawy ostrej postaci patologii u większości pacjentów są nieobecne, czasami chorobie towarzyszą bolesne odczucia w jamie brzusznej, zmniejszona wydajność, zwiększone zmęczenie, utrata apetytu, ciemny odcień moczu, odbarwienie kału, zażółcenie skóry i błon śluzowych, ból stawów. Takie objawy występują zwykle 6-8 tygodni po zakażeniu, ale mogą pojawić się po sześciu miesiącach.

Wraz z rozwojem takich zjawisk należy skontaktować się z placówką medyczną i poddać się kompleksowemu badaniu całego organizmu. Badanie krwi na zapalenie wątroby typu C wykonuje się w ramach badania lekarskiego.

Dzisiaj, dzięki nowoczesnym technikom diagnostycznym, tę patologię można zidentyfikować na początkowym etapie rozwoju, co znacznie zwiększa szanse na całkowite wyleczenie choroby.

Następujące grupy ludzi są zobowiązane do przetestowania na zapalenie wątroby typu C:

  • kobiety w okresie posiadania dziecka;
  • osoby z objawami zapalenia wątroby;
  • personel medyczny;
  • potencjalni dawcy narządów i krwi;
  • narkomani, osoby zakażone wirusem HIV, rozwiązłe życie intymne.

Lista wymaganych badań

Jakie testy powinienem wykonać na zapalenie wątroby typu C? Aby dokładnie zdiagnozować chorobę, określić jej przyczyny i określić stan miąższu wątroby, wymagane są następujące badania:

  • ogólne badania moczu i krwi;
  • biochemiczna analiza krwi;
  • Analiza PCR;
  • badanie krwi w celu wykrycia przeciwciał przeciwko HVC;
  • badanie krwi na obecność istniejących przeciwciał we własnych komórkach wątroby;
  • biopsja wątroby.

Dekodowanie badań krwi na zapalenie wątroby typu C wykonuje specjalista. Rozważ szczegółowo każdą metodę badań, a także zrozumiemy, która analiza WZW typu C jest najdokładniejsza.

Ogólna analiza

Podczas wykonywania ogólnego badania krwi na zapalenie wątroby typu C można ocenić stan pacjenta. Zmiany parametrów krwi nie są postrzegane jako swoiste objawy zapalenia wątroby, jednak w przypadku tej choroby występują takie zaburzenia, jak:

  • zmniejszone stężenie hemoglobiny, płytek krwi i leukocytów;
  • zwiększa zawartość limfocytów;
  • krzepnięcie krwi jest naruszone;
  • wzrasta szybkość sedymentacji erytrocytów (ESR).

Ogólna analiza moczu umożliwia wykrycie w jego składzie urobeliny - pigmentu żółci występującego w moczu w wyniku zaburzenia czynności wątroby.

Analiza biochemiczna

Biochemiczna analiza krwi w wirusowym zapaleniu wątroby typu C umożliwia identyfikację takich zaburzeń, jak:

  • podwyższony poziom enzymów wątrobowych (transaminazy alaninowej - ALT i aminotransferazy asparaginianowej - AST), które dostają się do krwi w przypadku uszkodzenia hepatocytów. W stanie normalnym wskaźniki te dla mężczyzn nie powinny wynosić więcej niż 37 IU / l, dla kobiet - nie więcej niż 31 IU // l. Zwiększone stężenie ALT i AspAT w bezobjawowym wirusowym zapaleniu wątroby typu C jest często jedynym objawem tej choroby. Ponadto fosfataza alkaliczna glutamylowej transpeptydazy we krwi wzrasta we krwi (zwykle nie więcej niż 150 IU / l).
  • zawartość bilirubiny (zarówno ogólnej, jak i bezpośredniej) we krwi została przekroczona. Jeśli poziom żółtego pigmentu w surowicy przekracza 27-34 μmol / l, pojawia się żółtaczka (do 80 μmol / lw łagodnej postaci, 86-169 μmol / l - w umiarkowanej, powyżej 170 μmol / l - w ciężkiej postaci).
  • Poziom albumin jest obniżony, a stężenie gamma globulin, wręcz przeciwnie, jest zwiększone. Globuliny gamma składają się z immunoglobulin - przeciwciał, które chronią organizm przed substancjami chorobotwórczymi.
  • zwiększone stężenie trójglicerydów we krwi.

Test PCR

Za pomocą techniki PCR można zdiagnozować przyczynę choroby. Przeprowadzenie tej analizy umożliwia wykrycie wirusa we krwi, nawet jeśli jego ilość jest minimalna. Analiza PCR dla wirusowego zapalenia wątroby typu C umożliwia wykrycie istniejącego zakażenia krwi już po 5 dniach od momentu zakażenia, czyli na długo przed pojawieniem się przeciwciał.

Jeśli wynik testu krwi na WZW typu C za pomocą PCR jest dodatni, oznacza to obecność czynnej infekcji w organizmie. Za pomocą tej metody można przeprowadzić jakościowe i ilościowe badanie RNA HVC.

W trakcie jakościowej analizy PCR dla zapalenia wątroby typu C możliwe jest wykrycie istniejącego wirusa w ludzkim ciele.

Ta procedura diagnostyczna jest wykonywana, jeśli wykryto anty-HVC we krwi.

Rozszyfrowanie analizy zapalenia wątroby typu C zawiera informacje, że infekcja została wykryta lub nie została wykryta w organizmie. Zwykle we krwi nie występują żadne patologiczne substancje.

Jeśli test na zapalenie wątroby typu C jest dodatni, oznacza to, że patogen nieustannie dzieli i infekuje komórki wątroby.

Wyniki tej analizy mogą być niewiarygodne, jest to możliwe w następujących przypadkach:

  • zanieczyszczony wykorzystany biomateriał;
  • w obecności heparyny we krwi;
  • w obecności substancji chemicznych lub białkowych (inhibitorów) w badanym biomaterianie, wpływającym na elementy PCR.

Ilościowa analiza wirusowego zapalenia wątroby typu C dostarcza informacji o ilości wirusa zawartego we krwi, czyli określa obciążenie wirusem. Przez tę koncepcję rozumie się objętość RNA HVC obecnego we krwi (na przykład w 1 ml). W interpretacji analizy ilościowej dla zapalenia wątroby typu C wartość tę wyraża się w cyfrowym odpowiedniku, mierzonym w IU / ml.

Krew do PCR w przypadku zapalenia wątroby typu C pobierana jest przed zabiegami terapeutycznymi. Po przeprowadzeniu analizy po 1, 4, 12 i 24 tygodniach. Badanie w 12. tygodniu ma charakter orientacyjny i jest przeprowadzane w celu oceny skuteczności procedur medycznych.

Jeśli test na zapalenie wątroby typu C podczas ciąży jest dodatni i wartości wirusa są przekroczone, ryzyko przeniesienia patogenów z chorej matki na dziecko wzrasta kilkakrotnie. Ponadto, przy podwyższonych wartościach wiremii, wdrożenie środków terapeutycznych jest trudne.

Zgodnie z zapisami testów na zapalenie wątroby typu C, jeśli wartości wiremii przekraczają 800 000 IU / ml, wówczas jest ona wysoka. Jeśli liczby są poniżej 400 000 IU / ml, poziom wiremii jest uważany za niski.

Analiza wirusowego zapalenia wątroby typu C metodą PCR jest uważana za najdokładniejszą i ma kilka zalet w porównaniu z innymi opcjami badawczymi, a mianowicie:

  • bezpośrednia diagnoza czynnika sprawczego choroby. Podczas wykonywania tradycyjnych badań są określane przez obecność markerów białkowych, które są odpadami patogenów. To tylko wskazuje, że infekcja jest obecna we krwi. Podczas badania na wirusowe zapalenie wątroby typu C metodą PCR możliwe jest określenie rodzaju patogenu o niebezpiecznej patologii.
  • specyfika techniki. Podczas tej procedury wyznaczany jest unikalny region DNA w biomateriału, który odpowiada tylko jednemu typowi patogenu. Minimalizuje to prawdopodobieństwo fałszywych wyników.
  • wysoka czułość. Podczas wykonywania analizy PCR można wykryć minimalną ilość wirusa. Jest to ważne, jeżeli zostaną zidentyfikowane warunkowo patogenne substancje, które stanowią zagrożenie tylko wtedy, gdy ich poziom wzrasta.
  • Podczas stosowania tej techniki w jednej próbce biomateriału można wykryć jednocześnie kilka patogenów.
  • potrafi wykryć ukryte infekcje. Ponadto, analiza pozwala na zdiagnozowanie patogennych mikroorganizmów, które żyją wewnątrz komórek i mają wysoką zmienność antygenową.

Jeśli wyniki testu są pozytywne, to w biomaterianie znajdują się ślady wirusa, a następnie sieć ma infekcję w organizmie.

Negatywna analiza PCR dla zapalenia wątroby typu C oznacza, że ​​nie ma śladów zakażenia w biomateriałach.

Badania immunologiczne

Ta metoda pozwala zidentyfikować przeciwciała przeciwko wszystkim typom wirusów zapalenia wątroby, a także przeciwciała przeciwko komórkom wątroby własnego ciała, których pojawienie się przyczynia się do rozwoju autoimmunologicznego zapalenia wątroby.

Wyniki uzyskane podczas badania są istotne przez 3 miesiące, a następnie należy ponownie oddać krew na zapalenie wątroby typu C.

Możliwe jest również przeprowadzenie badania ekspresowego za pomocą specjalnych pasków testowych. Analiza ta pozwala na oznaczenie przeciwciał przeciwko wirusowi C w krwi i ślinie, która może być przeprowadzona niezależnie, w domu.

Biopsja wątroby

Aby wykonać taką analizę, pobierany jest element miąższu wątroby i wykonywane jest badanie histologiczne otrzymanego biomateriału. Pozwala to na ocenę stanu organizmu: rozpoznawanie ognisk zapalnych, nekrotycznych, stadium zwłóknienia i tak dalej.

Obecnie stosuje się testy zastępujące analizę histologiczną miąższu wątroby.

Aby ocenić stopień uszkodzenia wątroby i intensywność procesu zapalnego, wykorzystuje się określone biomarkery krwi żylnej. Za pomocą FibroTest można ocenić stopień wzrostu tkanki włóknistej.

Podczas wykonywania programu Actitest można uzyskać informacje o intensywności procesów patologicznych w miąższu wątroby. Za pomocą Steatototesta można zdiagnozować tkankę tłuszczową wątroby i ocenić zakres tego procesu. Fibromax składa się ze wszystkich powyższych testów i może zawierać kilka innych badań.

Przygotowanie do badania

Jakie testy są podejmowane na zapalenie wątroby typu C i jak dowiedzieliśmy się tego lub tego rodzaju badań. Równie ważne jest, aby wiedzieć, jak przygotować się do analizy.

Aby uzyskać wiarygodne wyniki, zaleca się przestrzeganie następujących wymagań:

  • Wirusowe zapalenie wątroby typu C należy pobierać rano, na pusty żołądek. Ostatnim posiłkiem należy spożyć co najmniej 8 godzin przed badaniem.
  • Biomateriał można zbierać w ciągu dnia lub wieczorem. W takim przypadku ważne jest, aby co najmniej 5-6 godzin upłynęło od ostatniego posiłku do analizy.
  • przed oddaniem krwi na zapalenie wątroby typu C, herbatę, kawę, sok lub inne napoje należy wyrzucić, dozwolona jest tylko woda.
  • 48 godzin przed badaniem należy wykluczyć stosowanie tłustych, smażonych potraw i napojów alkoholowych.
  • przez co najmniej godzinę przed analizą należy powstrzymać się od palenia.
  • Analizy nie należy wykonywać bezpośrednio po badaniu USG, instrumentalnym, badaniu rentgenowskim, masażu lub fizjoterapii.
  • na jeden dzień przed wdrożeniem badania należy wykluczyć stosowanie leków i intensywną aktywność fizyczną. Stres emocjonalny jest również przeciwwskazany.
  • Zaleca się spędzić 15 minut przed wykonaniem badania w spokojnym stanie.

Przeprowadzenie procedury pobierania krwi

Gdzie można uzyskać test na zapalenie wątroby typu C? Pobieranie próbek biomateriału do dalszych badań odbywa się w laboratorium instytucji medycznej lub w domu pacjenta.

Krew z żyły przyjmuje się w następujący sposób:

  • za pomocą specjalnej opaski uciskowej owiniętej wokół przedramienia pacjenta, żylny przepływ krwi zostaje zatrzymany. Dzięki takim manipulacjom żyły będą wypełnione krwią i będą bardziej widoczne, co znacznie ułatwi proces wprowadzania igły.
  • obszar skóry, do którego zostanie włożona igła, jest ostrożnie traktowany alkoholem lub płynem zawierającym alkohol.
  • Igła delikatnie wprowadza się do żyły, a następnie podłącza się do niej probówkę, specjalnie zaprojektowaną do pobierania krwi.
  • Natychmiast po włożeniu igły do ​​żyły, ściskająca szelka zostaje zdjęta z ramienia pacjenta.
  • po zebraniu objętości krwi niezbędnej do analizy igłę delikatnie usuwa się z żyły.
  • w miejscu wstrzyknięcia należy umieścić sterylny bawełniany wacik lub gazę nasączoną alkoholem.
  • Aby zapobiec pojawieniu się krwiaka, tampon należy naciskać z pewnym wysiłkiem na miejsce wkłucia igły, zgiąć ramię przy stawie łokciowym i przytrzymać w tej pozycji przez kilka minut. Takie działania pomogą także szybciej zatrzymać krew.

Pod warunkiem, że technika wewnętrznego podawania jest dobra, ta procedura jest całkowicie bezpieczna i nie powoduje bolesnych odczuć.

W rzadkich przypadkach po pobraniu krwi żyły mogą puchnąć. Zjawisko to jest nazywane "zapaleniem żył". Kompres (nie gorący) pomoże rozwiązać problem, powinien być stosowany do spuchniętych obszarów skóry kilka razy dziennie.

Pewne problemy mogą również wystąpić, jeśli występuje zaburzenie krwawienia. Przyjmowanie aspiryny, warfaryny i innych preparatów rozrzedzających krew może powodować krwawienie. Dlatego przed wykonaniem analizy należy odmówić przyjęcia jakiegokolwiek leku. Jeśli zabiegu nie można anulować, należy poinformować o tym specjalistę.

Terminy i ceny

Ile jest testowanych na zapalenie wątroby typu C? Wyniki badania krwi na zapalenie wątroby mogą być gotowe w ciągu kilku godzin, a także w ciągu kilku dni (z reguły nie więcej niż 8 dni). Czas przygotowania wyników zależy od rodzaju wirusa i wybranej metody analizy. Szybsze jest badanie prowadzone metodą PCR. Wyniki w tym przypadku będą gotowe za kilka godzin.

Ile kosztuje test na zapalenie wątroby typu C? W zależności od kliniki i złożoności badania cena zabiegu może wynosić od 400 do 11 000 rubli.

Należy pamiętać, że utworzenie wystarczającej ilości przeciwciał przeciwko HVC może potrwać kilka tygodni. Dlatego na wczesnym etapie rozwoju patologii wynik badania może być fałszywie ujemny.

Ponadto uzyskanie niewiarygodnych danych jest możliwe przy złej jakości analizie i naruszeniu warunków transportu uzyskanego biomateriału (próbki muszą być dostarczone do laboratorium maksymalnie 2 godziny po pobraniu krwi).

Jeśli wynik badania jest pozytywny, należy natychmiast skontaktować się z lekarzem chorób zakaźnych. Specjalista przeprowadzi dodatkowe badanie i zaleci odpowiednie leczenie.

Przeprowadzenie analizy PCR dla zapalenia wątroby typu C i dekodowanie wyników

Analiza PCR wirusa zapalenia wątroby typu C jest badaniem, którego głównym celem jest identyfikacja materiału genetycznego czynnika sprawczego. Analiza ujawnia czynnik sprawczy choroby za pomocą reakcji łańcuchowej polimerazy. Diagnoza ta ma wysoki stopień dokładności, swoistość wykrywania nieobecności lub obecności infekcji wirusowej.

Istota diagnozy

W celu przeprowadzenia analizy PCR w celu oznaczenia wirusa zapalenia wątroby typu C od pacjenta pobiera się krew żylną, która potencjalnie zawiera RNA (kwas rybonukleinowy) HCV pożądanego wirusa.

Test PCR pod kątem zapalenia wątroby typu C oznacza procedurę, w której do cząstek krwi pacjenta dodaje się:

  • primery (krótkie sztucznie syntetyzowane regiony niezbędnego genu);
  • specjalny enzym (polimeraza RNA).

Po pobraniu materiału biologicznego jest wysyłany do badań w laboratorium. Jedna porcja krwi jest potrzebna do bezpośredniej analizy PCR, druga jest wysyłana do badania metodą ELISA. Enzym jest w stanie w krótkim czasie zwiększyć liczbę materiału genetycznego wirusa patogenu. W specjalnym urządzeniu przeprowadza się kilka cykli procesów ogrzewania i chłodzenia. W końcowym etapie uzyskany materiał porównuje się z genami wirusa i wyciąga się wniosek o obecności lub braku patologii w ciele pacjenta.

Istota i przebieg analizy PCR w laboratorium. Nakręcony przez SyberianMedicalLaboratory.

Rodzaje badań

Istnieją 3 rodzaje diagnostyki, które umożliwiają wykrycie obecności wirusa zapalenia wątroby typu C w organizmie człowieka:

  • genotypowanie;
  • jakość;
  • ilościowy.

Metoda jakościowa

Rozpoznanie zapalenia wątroby typu C metodą jakościową dotyczy pacjentów, u których w teście krwi wykryto przeciwciała przeciwko wirusowi. W przypadku obecności ostrej fazy HCV RNA, takie środki diagnostyczne pozwalają na określenie obecności choroby w ciągu 1-2 tygodni po zakażeniu. W tym czasie nie można jeszcze opracować przeciwciał przeciwko wirusowemu zapaleniu wątroby typu C.

Metoda ilościowa

Do określenia stężenia wirusa w próbkach krwi wykorzystuje się ilościową metodę diagnostyczną. Taki test na wiremię (stopień koncentracji) umożliwia dokładne określenie liczby jednostek wirusowego RNA. Wynik końcowy jest wyrażony w odpowiedniej objętości. Jeśli mówimy o analizie ilościowej, to wskaźniki są mierzone w 1 ml (1 cub.

Parametr ładunku wirusa oznacza poziom zakaźności choroby, to znaczy odzwierciedla stopień "zakaźności" pacjenta. W praktyce oznacza to, że im wyższe jest stężenie wirusa we krwi, tym większe jest prawdopodobieństwo zakażenia innych przez wirusowe zapalenie wątroby typu C. Ilościowa metoda badań pozwala również ustalić jakość i skuteczność przeprowadzonego leczenia.

Genotypowanie

Genotypowanie ujawnia mutacje czynnika sprawczego choroby. Przed przepisaniem planu leczenia określa się genotyp wirusa: zależy od niego jakość i czas trwania terapii. Na przykład w leczeniu choroby typu I wydajność wynosi 60%, w przypadku typu II, III - około 80%.

Korzyści z analizy PCR dla zapalenia wątroby

Do głównych zalet tej procedury należą:

  1. Możliwość wczesnej diagnozy. Analiza PCR jest w stanie wykryć obecność wirusa we wczesnych stadiach infekcji.
  2. Niski wynik błędu. Badany zasób biologiczny pozwala na zdiagnozowanie części materiału genetycznego, która jest charakterystyczna tylko dla jednego typu infekcji wirusowej. Ta okoliczność pozwala uniknąć fałszywych wyników diagnostycznych.
  3. Wysoki stopień wrażliwości. Analiza PCR jest w stanie wykryć wirusy RNA w niewielkich ilościach, co umożliwia śledzenie latentnych infekcji w czasie.

Wskazania dla

Niezbędne jest badanie PCR dla wirusowego zapalenia wątroby typu C, jeżeli jest dostępne:

  • kontakt z chorymi, co może prowadzić do infekcji;
  • objawy marskości wątroby (powiększenie śledziony, nietypowe zmiany w wielkości wątroby, wykrycie splotu żylnego na brzuchu pod skórą);
  • pozytywne wyniki testu ELISA;
  • zwiększona aktywność AST i ALT (przejawiająca się w analizie biochemicznej krwi);
  • potrzeba kontrolowania przebiegu terapii antywirusowej;
  • początkowy etap leczenia w celu ustalenia miana wirusa;
  • prowadzenie ostatniego etapu terapii w celu wyeliminowania możliwych nawrotów;
  • obecność wirusa zapalenia wątroby typu B u pacjenta, aby wykluczyć rozwój mieszanego uszkodzenia wątroby.

Jak przygotować się do krwiodawstwa do badań PCR

Przygotowanie do analizy PCR zawiera następujące zalecenia:

  • krew jest pobierana rano;
  • analizę przeprowadza się na czczo, dlatego zaleca się przerwę między ostatnim posiłkiem 8-10 godzin;
  • kilka dni przed diagnozą należy wykluczyć tłuste, pikantne i smażone potrawy, napoje alkoholowe i palenie;
  • na jeden dzień przed analizą należy powstrzymać się od intensywnego wysiłku fizycznego, wykluczyć zajęcia na siłowni lub basenie.

Wyniki analizy: normy i odchylenia

Sama analiza nie jest długotrwała, a wysoko wykwalifikowany specjalista hepatolog lub specjalista od chorób zakaźnych odszyfrowuje wyniki PCR na WZW typu C. Na podstawie wyników analizy pacjent zostaje zdiagnozowany.

Aby poprawnie rozszyfrować wyniki ankiety, brane są pod uwagę następujące wskaźniki:

  • biochemiczna analiza krwi;
  • dane ultradźwiękowe;
  • wyniki biopsji.

Interpretacja analizy ilościowej

Po uzyskaniu wyników analizy ilościowej PCR uwzględnia się następujące wskaźniki:

Podstawowe testy na zapalenie wątroby typu C.

Wirusowe zapalenie wątroby typu C stanowi poważny problem medyczny i społeczny. Około 180 milionów ludzi na świecie cierpi na tę chorobę, 350 tysięcy umiera każdego roku. Długi utajony (bezobjawowy) przebieg wirusowego zapalenia wątroby typu C prowadzi do późnej diagnozy. Analiza wirusowego zapalenia wątroby typu C jest przeprowadzana w celu zdiagnozowania choroby, diagnostyki różnicowej, przy jej pomocy, określenia wcześniej przeniesionej choroby "stojącej". Badanie to stosuje się u pacjentów z objawami zapalenia wątroby typu C, podwyższonym poziomem enzymów wątrobowych, w uzyskaniu informacji o wcześniej przeniesionym zapaleniu wątroby o nieokreślonej etiologii, u osób zagrożonych i badaniach przesiewowych.

Rozpoznanie WZW typu C odbywa się w 2 etapach:

Etap 1 Oznaczenie obecności w surowicy przeciwciał przeciwko wirusowi zapalenia wątroby typu C (anty-HCV).

Etap 2 W obecności anty-HCV przeprowadza się test na obecność RNA (kwas rybonukleinowy) metodą PCR dla wirusa zapalenia wątroby typu C. Badanie pozwala zidentyfikować fazę procesu - "aktywny / nieaktywny", aby rozwiązać problem potrzeby leczenia. Wiadomo, że około 30% osób zakażonych wirusem zapalenia wątroby typu C samodzielnie usuwa infekcję, ponieważ mają silny układ odpornościowy i nie potrzebują leczenia. Zastosowanie PCR jest określane przez genotyp wirusa. Różne genotypy reagują inaczej na leczenie.

Stopień uszkodzenia wątroby w zapaleniu wątroby typu C określa się za pomocą biopsji lub innych badań inwazyjnych i nieinwazyjnych (na przykład fibrotest). Stopień stłuszczenia wątroby jest określany przez steatotestę. We wszystkich przypadkach rozpoznanie wirusowego zapalenia wątroby typu C powinno opierać się na danych z badań epidemiologicznych, klinice choroby i danych biochemicznych badań krwi.

Ryc. 1. Ciężkie skutki wirusowego zapalenia wątroby typu C - intensywne wodobrzusze.

Wirusowe zapalenie wątroby typu C test: anty-HCV

Przeciwciała anty-HCV (anty-HCV) są specyficznymi markerami infekcji. W ciele osoby chorej wytwarzane są specyficzne przeciwciała dla białek wirusa zapalenia wątroby typu C (antygeny) - immunoglobuliny klasy IgM i IgG (anty-HCV IgM / IgG).

Po otrzymaniu wyniku pozytywnego dla przeciwciał przeciw wirusowi zapalenia wątroby typu C, przeprowadza się test potwierdzający - oznaczenie całkowitych przeciwciał przeciwko strukturalnym i niestrukturalnym białkom wirusa. Konstrukcyjne białka otoczki wirusów E1 i E2 są wytwarzane przez IgM anty-HCV, C-cor z białkiem nukleokapsydu (IgG anty-HCV) i 7 niestrukturalnych białek-enzymów NS-anty HCV NS IgG.

Do wykrywania przeciwciał przeciw wirusowi zapalenia wątroby typu C stosuje się test immunoenzymatyczny (ELISA). Testy potwierdzające - RIBA (rekombinowane immunoblotting), rzadziej Inno-Lia (analiza syntetycznych peptydów) służy do potwierdzenia (+) wyników ELISA.

IgG anty HCV

  • Przeciwciała IgM HCV pojawiają się w surowicy 4-6 tygodni po zakażeniu i szybko osiągają maksimum. Pod koniec ostrego procesu (po 5 - 6 miesiącach) ich stężenie maleje.
  • Długoterminowa rejestracja obecności IgM anty-HCV wskazuje, że wirusowe zapalenie wątroby typu C nabrało przewlekłego przebiegu.
  • Wzrost poziomu IgM w okresie przewlekłego wirusowego zapalenia wątroby typu C sugeruje reaktywację procesu zakaźnego.
  • Poziom immunoglobulin IgM pozwala ocenić skuteczność leczenia.

IgG anty HCV

Przeciwciała IgG HCV pojawiają się w surowicy pacjenta od 11 do 12 tygodni po zakażeniu. Po 5-6 miesiącach rejestruje się szczytowe stężenie. Następne przeciwciała

pozostać na stałym poziomie przez cały czas trwania choroby w okresie ostrym i podczas okresu rekonwalescencji.

Całkowite przeciwciała przeciwko wirusowi zapalenia wątroby typu C.

Całkowite przeciwciała przeciwko wirusowi zapalenia wątroby typu C (anty HCV ogółem) są stosowane do diagnozy "świeżych" przypadków choroby. Całkowite przeciwciała są przeciwciałami przeciwko białku nukleokapsydowym C - cor (IgG anty HCV) i 7 niestrukturalnym enzymom białkowym NS (IgG anty HCV NS) przeciwko HCV NS3, NS4 anty HCV i NS5 anty HCV.

Całkowite przeciwciała przeciwko wirusowi zapalenia wątroby typu C pojawiają się w surowicy zakażonej osoby po 11-12 tygodniach od rozpoczęcia zakażenia, osiągają szczyt przez 5 do 6 miesięcy i pozostają na stałym poziomie przez cały okres choroby w ostrym okresie oraz w okresie 5 do 9 lat po okresie zdrowienia..

Każdy z rodzajów przeciwciał ma niezależną wartość diagnostyczną:

  • AntiHCVC (cor) są głównymi wskaźnikami kontaktu z wirusem zapalenia wątroby typu C.
  • AntiHCVNS3 wykrył jeden z pierwszych w procesie serokonwersji (wytwarzanie przeciwciał w odpowiedzi na obecność wirusa), wskazuje na ciężkość procesu zakaźnego i wskazuje na wysokie miano wirusa. Z ich pomocą, dziedziczne zapalenie wątroby typu C jest określane u pacjentów, którzy nie podejrzewają, że mają infekcję. Przedłużona obecność NS3 anty-HCV w surowicy wskazuje na wysokie ryzyko przewlekłości tego procesu.
  • AntiHCVNS4 sugeruje, że proces zakaźny ma długi przebieg. Poziom miana przeciwciał można ocenić na podstawie stopnia uszkodzenia wątroby.
  • AntiHCVNS5 wskazują na obecność wirusowego RNA. Ich odkrycie w ostrym okresie jest zapowiedzią przewlekłości tego procesu. Wysokie miana przeciwciał na tle leczenia sugerują, że pacjent nie reaguje na leczenie.
  • AntyHCVNS4 i antyHCVNS5. Ten rodzaj przeciwciał pojawia się w późnych stadiach rozwoju zapalenia wątroby. Ich zmniejszenie wskazuje na powstanie remisji procesu zakaźnego. Po leczeniu miana NS4 anty-HCV i NS5 anty-HCV zmniejszają się w ciągu 8 do 10 lat. Ten typ przeciwciała nie chroni przed ponowną infekcją.

Ryc. 2. Makrodrug wątroby. Marskość wątroby w wirusowym zapaleniu wątroby typu C.

Analiza dekodowania dla zapalenia wątroby typu C

Brak przeciwciał przeciwko wirusowi zapalenia wątroby typu C jest wskazany przez termin "Norma". Jednak nie zawsze oznacza to brak choroby u ludzi. Tak więc, brak przeciwciał we krwi osoby zakażonej jest rejestrowany, dopóki nie pojawią się we krwi - do 6 miesięcy od momentu infekcji (średnio 12 tygodni). Okres braku przeciwciał we krwi osoby zakażonej nazywany jest "serologicznym oknem". Systemy testowania trzeciej generacji (ELISA-3) mają wysoką specyficzność (do 99,7%). Około 0,3% stanowiły wyniki fałszywie dodatnie.

Obecność anty-HCV wskazuje na obecne zakażenie lub wcześniejsze zakażenie.

  • Wykrywanie przeciwciał IgM i anty-HCV Cor Cor IgG, wzrost miana przeciwciał anty HCV Cor1 IgG i (+) PCR w obecności klinicznych i laboratoryjnych objawów ostrego zapalenia wątroby wskazują na ostry okres choroby.
  • Wykrywanie przeciwciał IgG anty-IgM, anty-HCV, IgG anty-HCV i (+) PCR w obecności klinicznych i laboratoryjnych objawów zapalenia wątroby wskazuje na reaktywację przewlekłego wirusowego zapalenia wątroby typu C.
  • Wykrywanie IgG anty-HCV Coré i przeciwciał anty-HCV NS w przypadku braku klinicznych i laboratoryjnych objawów zapalenia wątroby i ujemny wynik PCR wskazuje, że pacjent ma przewlekłe zapalenie wątroby w fazie utajonej.

Ryc. 3. Makrodrug wątroby. Pierwotny rak wątroby. Jednym z powodów rozwoju onkologii jest marskość wątroby, rozwinięta na tle przewlekłego wirusowego zapalenia wątroby typu C.

Analiza PCR dla zapalenia wątroby typu C

Reakcja łańcuchowa polimerazy (PCR) jest "złotym standardem" diagnozy wirusowego zapalenia wątroby typu C. Wysoka czułość testu umożliwia wykrycie materiału genetycznego wirusów (RNA), nawet jeśli w badanym materiale jest ich tylko kilka. PCR jest w stanie wykryć wirusy RNA na długo przed pojawieniem się przeciwciał w surowicy, ale nie wcześniej niż od 5 dnia od momentu zakażenia. Po wykryciu choroby przez PCR, wirusy RNA wykrywane są nie tylko w surowicy, ale także w biopatach wątrobowych.

  • Reakcja łańcuchowa polimerazy pozwala na oznaczenie obecności lub braku wirusów zapalenia wątroby typu C we krwi i decyduje o rozpoczęciu leczenia. Wiadomo, że do 30% pacjentów pozbawia się infekcji, ponieważ mają silny układ odpornościowy i nie potrzebują leczenia.
  • W celu monitorowania skuteczności leczenia stosuje się PCR wirusa zapalenia wątroby typu C.
  • PCR stosuje się w nieobecności przeciwciał we krwi, ale w obecności silnego podejrzenia zapalenia wątroby typu C (podwyższone poziomy fosfatazy alkalicznej, całkowitej bilirubiny, 2-krotny nadmiar enzymów wątrobowych AST i ALT).
  • Analiza PCR zapalenia wątroby typu C jest stosowana do kontroli wewnątrzmacicznego przenoszenia wirusów zapalenia wątroby.

Obciążenie wirusowe zapalenia wątroby typu C.

Za pomocą analizy PCR można określić nie tylko obecność RNA wirusa we krwi - jakościową analizę (wykryto / nie wykryto), ale ich liczbę - obciążenie wirusem (liczba jednostek wirusowego RNA w 1 ml krwi). Wskaźnik ilościowy PCR służy do monitorowania skuteczności leczenia wirusowego zapalenia wątroby typu C.

Metody stosowane w PCR mają różną czułość. W Federacji Rosyjskiej, zgodnie z zaleceniami metodologicznymi z 2014 r., Zaleca się stosowanie metod o czułości 25 IU / ml lub mniejszej. Zgodnie z zaleceniami Europejskiego Stowarzyszenia Badań nad Wątrobą z 2015 r. Proponuje się zastosowanie metod oznaczania wirusowego RNA o czułości 15 IU / ml lub mniejszej.

W zależności od czułości systemu testowego, pacjent otrzymuje jeden lub drugi wynik badania:

  • Minimalna czułość analizatora COBAS AMPLICOR wynosi 600 IU / ml (analizator starszej generacji).
  • Minimalna czułość analizatora HCB-TEST COBAS AMPLICOR wynosi 50 IU / ml, co daje 100 kopii na ml.
  • Minimalna czułość analizatora HCV RealBest RNA wynosi 15 IU / ml, co daje 38 kopii na ml (w grupie nowoczesnych systemów testowych). Specyfika tych analizatorów wynosi 100%. Są one oznaczane przez HCV RNA wirusa podtypów 1a i 1b, 2a, 2b, 2c i 2i, 3, 4, 5a i 6.

Jeśli istnieją kopie RNA poniżej progu czułości tego analizatora, pacjent otrzymuje odpowiedź "nie wykryto".

Ryc. 4. Przykład analizy PCR (test ilościowy). Obciążenie wirusem określa się na zapalenie wątroby typu C.

Interpretacja wyników analizy PCR dla zapalenia wątroby typu C

  • Brak wirusa RNA wskazuje na brak infekcji.
  • Brak RNA przeciwko obecności przeciwciał we krwi wskazuje na zniknięcie wirusa zapalenia wątroby typu C pod wpływem leczenia lub samoleczenia.
  • W niektórych przypadkach wirus jest obecny we krwi, ale na poziomach podprogowych, gdy jego stężenie nie jest wychwytywane przez analizatory. Tacy pacjenci pozostają niebezpieczni pod względem infekcji.
  • Wykrywanie wirusa RNA przez 6 kolejnych miesięcy u pacjentów z ostrym zapaleniem wątroby typu C sugeruje, że choroba przybrała przewlekły przebieg.
  • Redukcja wirusowego RNA podczas leczenia wskazuje na skuteczność terapii i vice versa.

Ryc. 5. Tłuste zapalenie wątroby. Jedną z przyczyn uszkodzenia wątroby jest wirusowe zapalenie wątroby typu C.

Podstawowe biochemiczne testy krwi na WZW typu C

Biochemiczne badania krwi pomagają ustalić stan funkcjonalny wielu ludzkich narządów i układów.

Enzymy wątrobowe ALT i AST

Enzymy wątrobowe są syntetyzowane wewnątrzkomórkowo. Są zaangażowani w syntezę aminokwasów. Duża ich liczba znajduje się w komórkach wątroby, serca, nerek i mięśni szkieletowych. Po porażce narządów (naruszenie integralności błon komórkowych) enzymy dostają się do krwi, gdzie wzrasta ich poziom. Podwyższone poziomy enzymów rejestrowane są z porażką (lizą, zniszczeniem) komórek wątroby, zawałem mięśnia sercowego i innymi chorobami. Im wyższy poziom transaminaz w surowicy, tym więcej komórek uległo zniszczeniu. AlAT dominuje w komórkach wątroby, AST - w komórkach mięśnia sercowego. Wraz z niszczeniem komórek wątroby poziom ALT wzrasta 1,5 - 2 razy. Wraz ze zniszczeniem komórek miokardium poziom AST wzrasta o 8 - 10 razy.

Podczas diagnozowania przewlekłego wirusowego zapalenia wątroby należy zwrócić uwagę na stosunek AST / ALT (współczynnik de Ritis). Nadmiar AST nad ALT wskazuje na uszkodzenie komórek wątroby.

  • Norma AST dla mężczyzn wynosi do 41 jednostek / l, kobiety - do 35 jednostek / l, dzieci powyżej 12 lat - do 45 sztuk / l.
  • Norma ALT dla mężczyzn wynosi do 45 jednostek / l, kobiety - do 34 jednostek / l, dzieci 12 lat i więcej - do 39 jednostek / l.
  • Zwykle (u osób zdrowych) stosunek AST / ALT wynosi od 0,91 do 1,75.

Bilirubina

Bilirubina jest produktem rozkładu hemoglobiny. Bilirubina we krwi występuje w postaci pośredniej (do 96%) i bezpośredniej (4%). Proces rozkładu tej substancji występuje głównie w komórkach wątroby, gdzie jest wydalany z organizmu z żółcią. Wraz z niszczeniem komórek wątroby wzrasta poziom bilirubiny w surowicy. Zwykle całkowita zawartość bilirubiny jest mniejsza niż 3,4 - 21,0 μmol / L. Na poziomie 30-35 μmol / L i powyżej bilirubina przenika do tkanek, przez co skóra i twardówka stają się żółtaczką.

Ryc. 6. Gdy WZW typu C we krwi zwiększa poziom bilirubiny. Substancja przenika do tkanek, dlatego skóra i twardówka stają się żółtaczką.

Diagnostyka PCR dla WZW typu C

Wirusa zapalenia wątroby typu C - zapalenie wątroby komórki powstałe w wyniku infekcji wirusem HCV (HCV) w kontakcie z krwią zakażonej osoby. Kod genetyczny prowadzi Flavivirus cząsteczki HCV RNA (kwas ribonukleninovoy) zawarte w strukturze wirusa. To zagrażające życiu zjawisko wyróżnia się w początkowej fazie patologii tajemnicą. Odstęp czasu między zakażeniem a wystąpieniem objawów (odpowiedzi immunologicznej) może wynosić od jednego miesiąca do sześciu miesięcy. Z reguły choroba przyjmuje postać przewlekłą i jest trudna do wyleczenia.

Współczesna medycyna pozwala diagnozować patologię z niewielkimi uszkodzeniami wątroby. Najczęstsze i najbardziej skuteczne metody diagnostyczne obejmują analizę PCR. Rozważ w tym artykule, co to jest i jakie istnieją.

Jakie jest badanie

Analiza PCR dla zapalenia wątroby typu C jest badaniem laboratoryjnym, które wykrywa flawirus, materiał genetyczny kwasu rybonukleinowego (RNA). Określa liczbę cząsteczek RNA we krwi, jakość materiału biologicznego, rodzaj genetyczny flawirusa HCV.

Metoda PCR dla zapalenia wątroby typu C umożliwia wykrycie minimalnej ilości flawirusa przed tworzeniem przeciwciał, z reguły wkrótce po zakażeniu.

Badanie jest często określane jako analiza RNA, ponieważ wykrywa cząstki kwasu rybonukleinowego o wielkości 30-60 nm zawarte w flawiwirusie.

Badanie prowadzi się w następujący sposób: na czczo pacjent podaje krew z żyły, która następnie jest badana różnymi metodami:

  • Real-Time PCR jest przeprowadzany w sposób zamknięty w sposób zautomatyzowany i ma niższy limit wykrywania wirusów RNA o wartości 15 IU / ml;
  • COBAS AMPLICOR o czułości 50-100 IU / ml.

Im wyższy próg czułości techniki diagnostycznej, tym większe szanse na wykrycie najniższej zawartości wirusa w badanym materiale biologicznym.

Jakie rodzaje analizy są używane

Analiza, którą z powodzeniem stosowano przez kilka dziesięcioleci nazywa się zapaleniem wątroby typu PCR i można ją wykryć dość łatwo i szybko. W medycynie istnieją dwie metody reakcji, zasadniczo różniące się od siebie:

  • metoda jakościowa ujawnia obecność w materiale biologicznym genetycznego źródła danego wirusa;
  • analiza ilościowa mierzy liczbę materii genetycznej, co pozwala określić stadium patologii lub ocenić skuteczność przebiegu terapeutycznego;
  • genotypowanie określa rodzaj wirusa obecnego w ciele.

Ogólnie rzecz biorąc, badanie krwi pomaga zidentyfikować naturę wiremii i genetyczny typ patogenu. Z reguły badanie przeprowadza się 1 raz w zależności od stopnia czułości systemu diagnostycznego. Jeśli to konieczne, ponowne testowanie przeprowadza się za pomocą odczynnika o dużej czułości.

Wysokiej jakości PCR

Co to jest wysokiej jakości RNA PCR dla wirusowego zapalenia wątroby typu C? Istotą reakcji jest obecność sekwencji RNA wirusa zapalenia wątroby, a reakcja jest możliwa tylko w obecności białek wirusowych o podobnej etymologii w teście ELISA. W procesie porównania wykrywane jest obciążenie i możliwe uszkodzenie obszaru wątroby.

Charakterystyczną cechą tej metody jest zdolność wykrywania nawet obecności odrębnego genu.

Należy zauważyć, że po otrzymaniu wyników testów PCR i ELISA pacjent wymaga odpowiedniego leczenia, niezależnie od tego, jaki był końcowy wynik testu immunoenzymatycznego. Wynik pozytywny wskazuje na zakażenie, a wynik negatywny PCR wskazuje na zmniejszoną liczbę cząsteczek wirusa w stosunku do poziomu czułości.

Istnieje kilka warunków, które wpływają na wytwarzanie ujemnej reakcji PCR i testu ELISA:

  • brak odpowiednich warunków dla gromadzenia materiału;
  • wynikowa analiza zawiera zanieczyszczenia;
  • w przypadku wczesnego wstrzyknięcia heparyny pacjentowi.

Ze strony pacjenta nie jest konieczne przestrzeganie pewnych zasad pobierania próbek krwi do analizy PCR, w tym przypadku jakość tej analizy zależy od lekarza wykonującego zabieg. Zdolność do ustalenia obecności choroby (szczególnie w ostrej postaci) pojawia się w ciągu kilku tygodni po zakażeniu.

Analiza ilościowa

Zaleca się badanie ilościowe w celu wykrycia obciążenia wirusowego bezpośrednio przed utworzeniem dalszej terapii i reakcji organizmu. Proces pobierania krwi jest przeprowadzany w podobny sposób, jak przy wysokiej jakości PCR i ELISA, jedynym warunkiem jest brak palenia pacjenta przed zabiegiem.

Jeśli chodzi o charakterystykę danych uzyskanych w wyniku badania, zwiększone obciążenie charakteryzuje się wskaźnikami z 800000 IU / ml, niskie - 400000 IU / ml. Obecność wirusa w ciele pacjenta jest wskazywana przez PCR dla zapalenia wątroby nie jest ujemnym testem jakościowym.

Tego rodzaju badania umożliwiają ustalenie, jak niebezpieczny jest pacjent wobec otaczających go osób. Na przykład identyfikacja wysokiego poziomu wskazuje na zwiększoną infekcyjność pacjenta. Ponadto wyniki analizy pomagają sformułować dalsze najskuteczniejsze leczenie i określić, w jakim stopniu istniejąca terapia jest uważana za skuteczną.

Szybka negatywna odpowiedź testów wskazuje na powodzenie wybranej techniki, a powolna wskazuje na potrzebę korekty i stosowania zróżnicowanego leczenia.

Proces podejmowania analizy zależy od konkretnego dnia choroby. Pierwsze oznaczenie wykonuje się pierwszego dnia po przyjęciu pacjenta do szpitala, następnie zabieg powtarza się w 4, 12 i 24 tygodniu po przyjęciu leku.

Tak więc analiza ilościowa pokazuje, które leczenie jest najskuteczniejsze, czas trwania dostępnej terapii i zagrożenie pacjenta w stosunku do innych osób.

Genotypowanie

W badaniu analizy materiałowej ważne jest ustalenie dokładności genotypu wirusa, który ma miejsce. Obecnie istnieje 11 odmian wirusa zapalenia wątroby typu C, które z kolei obejmują pewne podgatunki.

Wszystkie te gatunki reagują odmiennie na różne metody leczenia, a poszczególne gatunki są całkowicie odporne na wiele leków.

Genotyp umożliwia określenie i wskazanie stanu wątroby. Nierzadko zdarza się, że wyniki są rejestrowane jako "nie wpisane", co oznacza, że ​​wirus w krwi pacjenta nie jest wykrywany przez ten system testowy. Można to wykryć, jeśli dany genotyp nie odpowiada tej strefie. W takiej sytuacji analiza jest wykonywana wielokrotnie, a do badania materiału wykorzystywany jest bardziej czuły system.

Metoda Ultra Sensitive

Metoda ultra wrażliwa jest konieczna w niektórych przypadkach, gdy rozpoznanie zapalenia wątroby nie może być przeprowadzone innymi metodami, a kiedy wziąć udział w analizie, lekarz prowadzący:

  • w przypadku podejrzenia obecności wirusa zapalenia wątroby typu C u pacjentów z utajonym typem choroby;
  • obecność przeciwciał przeciwko wirusowi zapalenia wątroby typu C, nie potwierdzona przez diagnostykę PCR;
  • w celu określenia jakości skuteczności wybranej metody leczenia i potwierdzenia eliminacji choroby.

Czułość tej metody jest znacznie wyższa niż zwykle stosowana, jednak ta metoda nie wyklucza uzyskania fałszywych wyników, zarówno pozytywnych, jak i negatywnych. W takiej sytuacji ważne jest kontrolowanie jakości procedury i możliwości skażenia samego materiału.

Wyjaśnienie analizy PCR

Dekodowanie analizy odbywa się na podstawie przedstawionych materiałów, a wyniki badań laboratoryjnych obejmują określone dane opisane powyżej.

Dekodowanie może obejmować pozytywną reakcję łańcuchową polimerazy PCR i negatywny test ELISA w teście, co oznacza, że ​​pacjent nie ma żadnych objawów zapalenia wątroby typu C we krwi, ale w przeszłości przenosił ostrą postać choroby. Z reguły przy diagnozowaniu specjaliści wykorzystują wskaźniki testu PCR.

Podsumowując powyższe, można stwierdzić, że podczas analizy ważne jest przestrzeganie wszystkich zasad i zaleceń, aby uzyskiwane wyniki były jak najbardziej dokładne, a na podstawie uzyskanych danych można określić skuteczność zastosowanej terapii i dalszą szansę pełnego wyzdrowienia.

Analiza PCR dla zapalenia wątroby typu C

Do diagnozy "przewlekłego wirusowego zapalenia wątroby typu C (CVHS)" wymaga kompleksowego badania osoby, która obejmuje badania kliniczne, laboratoryjne i instrumentalne. Ważne z punktu widzenia rozpoznania prawidłowej diagnozy jest metoda PCR - reakcja łańcuchowa polimerazy.

Co pokazuje ta analiza i dlaczego jest potrzebna?

Ta metoda laboratoryjna wykrywa RNA wirusa zapalenia wątroby typu C w ludzkiej krwi. Wraz z enzymatycznym testem immunoenzymatycznym (ELISA) na przeciwciała przeciw wirusowi, PCR służy do diagnozy CVHC i genotypu jego patogenu. To badanie jest jedną z najnowszych metod diagnostyki laboratoryjnej. Jego niezawodność w CVHS przekracza 97%, co jest uważane za bardzo dobry wskaźnik dla badań.

Istnieją trzy badania PCR na krew CVHC: jakościowe, ilościowe i genotypowanie wirusa. Pierwsze badanie (analiza jakościowa) wirusa wykrywa go we krwi, a zatem jest wykorzystywane wyłącznie do diagnozy.

Drugie (ilościowe) badanie określa stopień miana wirusa na ciele, dlatego też służy do monitorowania skuteczności terapii.

Trzeci PCR (genotypowanie) wyjaśnia diagnozę, ustalając genotyp wirusa, co jest bardzo ważne dla wyznaczenia prawidłowego leczenia przeciwwirusowego.

Istotą techniki reakcji łańcuchowej polimerazy jest zastosowanie enzymów, które namnażają materiał genetyczny patogenu w biomateriału. W procesie takiej replikacji probówkę z krwią kilkakrotnie ogrzewa się i chłodzi do temperatury wymaganej do przyspieszenia reakcji enzymatycznej. W wyniku tych manipulacji ilość wirusowego genomu wzrasta wiele razy, umożliwiając wykrycie go nawet przy minimalnej ilości.

Diagnostyka PCR ma wiele zalet w porównaniu z innymi testami laboratoryjnymi:

  • wysoka czułość - 97-98%;
  • gwarantowana analityczna specyficzność (ujawnia dokładnie patogen, który chcesz znaleźć, a nie związany z nim szczep);
  • szybkość prowadzenia (uzyskanie wniosku nie trwa dłużej niż 2 dni).

Trzy rodzaje testów PCR

Wysokiej jakości analizę PCR przypisuje się wszystkim pacjentom, u których w analizie ELISA wykryto przeciwciała przeciwko wirusowi HVGS. Po przeprowadzeniu wysokiej jakości PCR można uzyskać dwie opcje odpowiedzi: "wykryto RNA" lub "RNA nie zostanie wykryty". Aby wykryć minimalną ilość wirusa we krwi, potrzebne są systemy testowe o czułości co najmniej 50 IU / ml. Jeśli stężenie wirusa we krwi pacjenta jest mniejsze niż to możliwe, to wynik badania może być fałszywie ujemny. Aby uniknąć takiego błędu diagnostycznego, laboratoria prowadzące diagnostykę PCR powinny mieć zapewnione bardzo czułe systemy testowe. Na przykład w laboratorium "Invitro" stosuje się testy o czułości 15 IU / ml. Pracownicy laboratoriów są zobowiązani do udzielenia informacji na temat czułości testów pacjentom i lekarzom na ich pierwsze żądanie.

Ilościowa analiza PCR określa stopień wiremii, czyli stężenie patogenu we krwi, miano wirusa. Wynik tego badania, w przeciwieństwie do wysokiej jakości PCR, wyrażony jest w liczbach, na przykład 2 × 10 * 6 IU / ml, co oznacza 2 miliony jednostek międzynarodowych w 1 ml krwi. Niektóre laboratoria używają innego wskaźnika - liczby kopii / ml. Te dwa wskaźniki można łatwo przekonwertować: 1 jednostka międzynarodowa to 4 kopie RNA. Zatem 2 x 10 * 6 IU / ml będzie oznaczało, że 8 x 10 * 6 kopii wirusowego RNA w 1 ml, tj. 8 milionów kopii w 1 ml krwi.

Genotypowanie jest definicją jednego z sześciu genotypów wirusa. Obraz kliniczny, tempo rozwoju powikłań wątroby i rokowanie dla przyszłego życia pacjenta zależą od genotypu czynnika sprawczego. Genotyp wirusa jest bardzo ważny już na etapie diagnozy, ponieważ połączenie leków i czas trwania kursu terapeutycznego, który należy przypisać pacjentowi, zależy od jego prawidłowego określenia.

Jednak nawet te pozornie "doskonałe" badania laboratoryjne mają swoje wady:

  • badanie powiela materiał genetyczny wszystkich patogenów, nawet nieożywionych, które mogą zniekształcić wynik. Dlatego, w celu monitorowania skuteczności za pomocą PCR, ponowna analiza jest przeprowadzana nie wcześniej niż 2 miesiące po poprzedniej, tak aby martwe wirusy mogły "opuścić" ciało pacjenta;
  • część genomu wirusowego, która jest określana za pomocą systemów testowych, może teoretycznie być obecna w innych wirusach lub mikroorganizmach, więc istnieje możliwość fałszywie pozytywnej odpowiedzi;
  • wirusy mutują szybko. Czasami szybkość i zasięg mutacji wirusa jest tak duża, że ​​system testowy przestaje wychwytywać swój genom. W rezultacie możliwy jest wynik fałszywie ujemny.

Aby zrównoważyć te niedociągnięcia, producenci laboratoryjnych systemów testowych do diagnostyki PCR stale prowadzą swoje testy, w tym reakcje krzyżowe i wrażliwość na konkretny genotyp wirusa.

Jak wykonać test PCR na zapalenie wątroby typu C?

Aby wynik badania PCR był wiarygodny, należy ściśle przestrzegać zasad przygotowania do jego przeprowadzenia:

  • badania prowadzone są na czczo (glukoza, tłuszcze, minerały, które dostają się do krwi z pożywienia, mogą wpływać na szybkość i jakość reakcji enzymatycznej);
  • przerwa między ostatnim posiłkiem a pobieraniem krwi do analizy powinna wynosić co najmniej 8 godzin;
  • w przeddzień badania zabrania się spożywania alkoholu i spożywania tłustych potraw, których okres eliminacji jest przedłużany;
  • dzień przed pójściem do laboratorium należy unikać silnego stresu fizycznego i emocjonalnego;
  • do czasu pobrania krwi nie zaleca się palenia.

Aby uniknąć pojawienia się fałszywych wniosków, domniemany pacjent musi przyjść do laboratorium nieco wcześniej niż zostanie pobrana krew. Potrzeba 15-20 minut, aby osoba złapała oddech, uspokoić się. Adrenalina, która jest obecna we krwi po szybkim spacerze, może wpłynąć na wynik badania.

Jeśli pacjent skierowany do analizy przyjmuje jakiekolwiek leki, powinien o tym powiadomić lekarza. Jest możliwe, że niektóre z nich będą musiały zostać odrzucone na jakiś czas (jeśli to możliwe).

Wynik analizy PCR dla zapalenia wątroby typu C

Dekodowanie wyników zaangażowanych w laboratorium lekarza laboratorium, które przeprowadziło analizę. Dekodowanie jest definicją odchylenia wyniku uzyskanego od normy. Wskaźnik wskaźników ustalany jest bezpośrednio przez producenta systemu testowego, który jest wykorzystywany przez laboratorium do diagnostyki. Dlatego nie jest zaskakujące, że w niektórych laboratoriach obciążenie wirusowe określa się w IU / ml, a w innych w kopiach / ml.

Po otrzymaniu wniosku konieczne jest jego prawidłowe zinterpretowanie. Leczenie wyników badania powinno być prowadzone przez lekarza prowadzącego pacjenta z WZW typu C. Tylko po obiektywnym, instrumentalnym i laboratoryjnym badaniu pacjenta lekarz może uzyskać wystarczającą ilość danych dla prawidłowej interpretacji uzyskanych wyników PCR.

Ocena analizy jakościowej z reguły nie powoduje trudności, nawet u pacjentów. Wynik może być tylko jeden: "wykryto" lub "nie wykryto". W tym przypadku druga z nich jest normą.

Wskaźniki analizy ilościowej są trudniejsze do zinterpretowania. Pokazuje stopień obciążenia wirusem pacjenta. Nawet wśród hepatologów nie ma zgody co do sposobu leczenia wykrytej wiremii. Większość lekarzy jest skłonna uwierzyć, że należy wziąć pod uwagę wysoki ładunek większy niż 8 × 10 * 5 IU / ml. Obciążenie większe niż 1 × 10 * 7 IU / ml jest uważane za bardzo wysokie, podczas gdy niskie obciążenie jest mniejsze niż 4 × 10 * 5 IU / ml.

Stopień obciążenia wirusowego wskazuje na wirulencję (agresywność) wirusa: im większa jest jego ilość we krwi, tym szybciej mogą rozwinąć się powikłania wątroby. Wysokie stężenie wirusa we krwi kobiety w ciąży zwiększa prawdopodobieństwo przeniknięcia przez barierę krew-łożysko do płodu. Viremia wpływa również na skuteczność leczenia: przy niskiej liczbie skuteczność terapii jest wyższa niż w przypadku terapii wysokimi.

Aby mieć pewność co do dokładności analizy PCR w przypadku zapalenia wątroby typu C, konieczne jest nadanie pierwszeństwa tylko tym laboratoriom, które pracowały dobrze. Polityka cenowa w tym przypadku nie powinna odgrywać głównej roli.


Więcej Artykułów O Wątrobę

Wirusowe zapalenie wątroby

Tabela dietetyczna nr 5 dla dzieci

Tabela dietetyczna nr 5 dla dzieci jest zalecana przez lekarza prowadzącego w różnych chorobach pęcherzyka żółciowego, wątroby i dróg żółciowych. Choroby te obejmują zapalenie żołądka, zapalenie wątroby, zapalenie trzustki i kamicę żółciową.
Wirusowe zapalenie wątroby

Deformacja pęcherzyka żółciowego u dziecka

Woreczek żółciowy jest ważnym narządem, bez którego normalne funkcjonowanie organizmu jest niemożliwe.Coraz częściej dzieci mają patologie związane z tym konkretnym narządem.